ВИТАЛЬНАЯ ОКРАСКА: различия между версиями

 
 
Строка 1: Строка 1:
'''ВИТАЛЬНАЯ ОКРАСКА''' (лат. vitalis жизненный, живой) — прижизненная окраска животных или растительных клеток и тканей. С этой целью пользуются почти безвредными или малотоксичными красителями. Впервые витальное окрашивание произвел австрийский ученый Унгер (F. Unger, 1848), который ввел в белые лепестки гиацинта сок красных плодов Phytolacca. В гистофизиологии животных В. о. с помощью аммиачного кармина и ин-диго-сернокислого натрия впервые была применена русским ученым Н. А. Хржонщевским (1864, 1866) при исследовании функции почек и печени.
+
'''ВИТАЛЬНАЯ ОКРАСКА''' (лат. vitalis жизненный, живой) — прижизненная окраска животных или растительных клеток и тканей. С этой целью пользуются почти безвредными или малотоксичными красителями. Впервые витальное окрашивание произвел австрийский ученый Унгер (F. Unger, 1848), который ввел в белые лепестки гиацинта сок красных плодов Phytolacca. В гистофизиологии животных В. о. с помощью аммиачного кармина и индиго-сернокислого натрия впервые была применена русским ученым Н. А. Хржонщевским (1864, 1866) при исследовании функции почек и печени.
  
В. о. является одним из важных экспериментальных методов цито- и гистофизиологии. Иногда В. о. используется в клинике в качестве функциональной пробы при изучении физиол, полноценности почек (см. [[ХРОМОЦИСТОСКОПИЯ|Хромоцистоскопия]]).
+
В. о. является одним из важных экспериментальных методов цито- и гистофизиологии. Иногда В. о. используется в клинике в качестве функциональной пробы при изучении физиологической полноценности почек (см. [[ХРОМОЦИСТОСКОПИЯ|Хромоцистоскопия]]).
  
 
С помощью В. о. возможно: 1) изучение закономерностей поступления, накопления и выделения веществ, участвующих в метаболизме организма; 2) визуальное исследование некоторых физиол, процессов (секреции, экскреции); 3) маркировка определенных участков организма (органов, эмбриональных зачатков животных и растений, клеток или их органелл); 4) изучение физиол, состояния клетки в норме и при различных раздражающих и повреждающих воздействиях; 5) обнаружение в клетке определенных хим. веществ (нуклеиновых кислот, белков). Наиболее удобный объект для проведения В. о.— культуры клеток и тканей, однако В. о. успешно применяется и для кусочков органов и даже небольших животных и растений, целиком погружаемых в краситель. В. о. проводится также путем инъекции красителя в животную или растительную ткань. Распределение красителя в клетках и тканях обычно наблюдают под светооптическим микроскопом, а в тех случаях, когда для В. о. используют флюоресцирующие красители (флюорохромы),— с помощью люминесцентного микроскопа, что значительно повышает чувствительность исследования.
 
С помощью В. о. возможно: 1) изучение закономерностей поступления, накопления и выделения веществ, участвующих в метаболизме организма; 2) визуальное исследование некоторых физиол, процессов (секреции, экскреции); 3) маркировка определенных участков организма (органов, эмбриональных зачатков животных и растений, клеток или их органелл); 4) изучение физиол, состояния клетки в норме и при различных раздражающих и повреждающих воздействиях; 5) обнаружение в клетке определенных хим. веществ (нуклеиновых кислот, белков). Наиболее удобный объект для проведения В. о.— культуры клеток и тканей, однако В. о. успешно применяется и для кусочков органов и даже небольших животных и растений, целиком погружаемых в краситель. В. о. проводится также путем инъекции красителя в животную или растительную ткань. Распределение красителя в клетках и тканях обычно наблюдают под светооптическим микроскопом, а в тех случаях, когда для В. о. используют флюоресцирующие красители (флюорохромы),— с помощью люминесцентного микроскопа, что значительно повышает чувствительность исследования.
Строка 8: Строка 8:
 
[[Файл: vitalis_color2.jpg|мини|alt=Рис. 2. Чешуя лука при различной реакции среды: а — pH = 4,7 — окрашены только оболочки клеток; — pH = 7,2 — диффузно окрашен клеточный сок вакуолей (нейтральный красный).|Рис. 2. Чешуя лука при различной реакции среды: а — pH = 4,7 — окрашены только оболочки клеток; — pH = 7,2 — диффузно окрашен клеточный сок вакуолей (нейтральный красный).]]
 
[[Файл: vitalis_color2.jpg|мини|alt=Рис. 2. Чешуя лука при различной реакции среды: а — pH = 4,7 — окрашены только оболочки клеток; — pH = 7,2 — диффузно окрашен клеточный сок вакуолей (нейтральный красный).|Рис. 2. Чешуя лука при различной реакции среды: а — pH = 4,7 — окрашены только оболочки клеток; — pH = 7,2 — диффузно окрашен клеточный сок вакуолей (нейтральный красный).]]
  
[[Файл: vitalis_color3.jpg|мини|alt= Рис. 3. Нервные клетки пиявки: а — в норме, краситель отложился в виде гранул, ядро не окрашено; 6— в условиях паранекроза, диффузная окраска цитоплазмы, окрашены структуры ядра (нейтральный красный).| Рис. 3. Нервные клетки пиявки: а — в норме, краситель отложился в виде гранул, ядро не окрашено; 6— в условиях паранекроза, диффузная окраска цитоплазмы, окрашены структуры ядра (нейтральный красный).
+
[[Файл: vitalis_color3.jpg|мини|alt= Рис. 3. Нервные клетки пиявки: а — в норме, краситель отложился в виде гранул, ядро не окрашено; 6— в условиях паранекроза, диффузная окраска цитоплазмы, окрашены структуры ядра (нейтральный красный).| Рис. 3. Нервные клетки пиявки: а — в норме, краситель отложился в виде гранул, ядро не окрашено; 6— в условиях паранекроза, диффузная окраска цитоплазмы, окрашены структуры ядра (нейтральный красный).]]
]]
 
 
Для В. о. используют гл. обр. различные анилиновые красители, применяемые при гистол, методах исследования: кислотные (анионные), основные (катионные) и нейтральные (цветн. рис. 1—3). Водные растворы кислотных красителей плохо проникают в нормальную клетку. Поскольку проницаемость резко повышается при повреждающих воздействиях, эти красители (эозин) используют для выявления клеточного повреждения. Коллоидные растворы кислых красителей (трипановый синий, литиевый кармин и др.) проникают в клетку путем фагоцитоза и используются гл. обр. для изучения ретикулоэндотелиальной системы.
 
Для В. о. используют гл. обр. различные анилиновые красители, применяемые при гистол, методах исследования: кислотные (анионные), основные (катионные) и нейтральные (цветн. рис. 1—3). Водные растворы кислотных красителей плохо проникают в нормальную клетку. Поскольку проницаемость резко повышается при повреждающих воздействиях, эти красители (эозин) используют для выявления клеточного повреждения. Коллоидные растворы кислых красителей (трипановый синий, литиевый кармин и др.) проникают в клетку путем фагоцитоза и используются гл. обр. для изучения ретикулоэндотелиальной системы.
  
Строка 24: Строка 23:
  
  
'''Библиография:''' Граменицкий E. М. Прижизненная окраска клеток и тканей в норме и патологии, Л., 1963, библиогр. ; Зеленин А. В. Взаимодействие амино-производных акридина с клеткой, М., 1971, библиогр.; Л e в и н С. В. и Голь-ф а н д К. А. Методика цитофотометрии витально окрашенных клеток, Цитология, т. 6, № 4, с. 525, 1964, библиогр.
+
'''Библиография:''' [https://search.rsl.ru/ru/record/01006093035 Граменицкий E. М. Прижизненная окраска клеток и тканей в норме и патологии, Л., 1963, библиогр.]; Зеленин А. В. Взаимодействие амино-производных акридина с клеткой, М., 1971, библиогр.; Левин С. В. и Гольфанд К. А. Методика цитофотометрии витально окрашенных клеток, Цитология, т. 6, № 4, с. 525, 1964, библиогр.
 +
 
  
 
''Ю. И. Афанасьев, С. Я. Залкинд.''
 
''Ю. И. Афанасьев, С. Я. Залкинд.''
 
[[Category:Том 4]]
 
[[Category:Том 4]]

Текущая версия на 2019-10-07T19:21:14

ВИТАЛЬНАЯ ОКРАСКА (лат. vitalis жизненный, живой) — прижизненная окраска животных или растительных клеток и тканей. С этой целью пользуются почти безвредными или малотоксичными красителями. Впервые витальное окрашивание произвел австрийский ученый Унгер (F. Unger, 1848), который ввел в белые лепестки гиацинта сок красных плодов Phytolacca. В гистофизиологии животных В. о. с помощью аммиачного кармина и индиго-сернокислого натрия впервые была применена русским ученым Н. А. Хржонщевским (1864, 1866) при исследовании функции почек и печени.

В. о. является одним из важных экспериментальных методов цито- и гистофизиологии. Иногда В. о. используется в клинике в качестве функциональной пробы при изучении физиологической полноценности почек (см. Хромоцистоскопия).

С помощью В. о. возможно: 1) изучение закономерностей поступления, накопления и выделения веществ, участвующих в метаболизме организма; 2) визуальное исследование некоторых физиол, процессов (секреции, экскреции); 3) маркировка определенных участков организма (органов, эмбриональных зачатков животных и растений, клеток или их органелл); 4) изучение физиол, состояния клетки в норме и при различных раздражающих и повреждающих воздействиях; 5) обнаружение в клетке определенных хим. веществ (нуклеиновых кислот, белков). Наиболее удобный объект для проведения В. о.— культуры клеток и тканей, однако В. о. успешно применяется и для кусочков органов и даже небольших животных и растений, целиком погружаемых в краситель. В. о. проводится также путем инъекции красителя в животную или растительную ткань. Распределение красителя в клетках и тканях обычно наблюдают под светооптическим микроскопом, а в тех случаях, когда для В. о. используют флюоресцирующие красители (флюорохромы),— с помощью люминесцентного микроскопа, что значительно повышает чувствительность исследования.

Рис. 1. Макрофаг из подкожной соединительной ткани крысы (толуидиновый синий).
Рис. 1. Макрофаг из подкожной соединительной ткани крысы (толуидиновый синий).
Рис. 2. Чешуя лука при различной реакции среды: а — pH = 4,7 — окрашены только оболочки клеток; — pH = 7,2 — диффузно окрашен клеточный сок вакуолей (нейтральный красный).
Рис. 2. Чешуя лука при различной реакции среды: а — pH = 4,7 — окрашены только оболочки клеток; — pH = 7,2 — диффузно окрашен клеточный сок вакуолей (нейтральный красный).
Рис. 3. Нервные клетки пиявки: а — в норме, краситель отложился в виде гранул, ядро не окрашено; 6— в условиях паранекроза, диффузная окраска цитоплазмы, окрашены структуры ядра (нейтральный красный).
Рис. 3. Нервные клетки пиявки: а — в норме, краситель отложился в виде гранул, ядро не окрашено; 6— в условиях паранекроза, диффузная окраска цитоплазмы, окрашены структуры ядра (нейтральный красный).

Для В. о. используют гл. обр. различные анилиновые красители, применяемые при гистол, методах исследования: кислотные (анионные), основные (катионные) и нейтральные (цветн. рис. 1—3). Водные растворы кислотных красителей плохо проникают в нормальную клетку. Поскольку проницаемость резко повышается при повреждающих воздействиях, эти красители (эозин) используют для выявления клеточного повреждения. Коллоидные растворы кислых красителей (трипановый синий, литиевый кармин и др.) проникают в клетку путем фагоцитоза и используются гл. обр. для изучения ретикулоэндотелиальной системы.

Основные красители, как правило, хорошо проникают в живую клетку. Их дальнейшее распределение в клетке зависит от ее состояния. В неповрежденной или мало поврежденной клетке основные красители аккумулируются в лизосомах в виде ясно выраженных цитоплазматических гранул, поэтому флюорохром акридиновый оранжевый широко используется для прижизненного выявления лизосом. При значительном повреждении клетки прекращается накопление красителей в лизосомах и появляется диффузная окраска ядра и цитоплазмы. Изменение окраски может носить обратимый характер — так наз. паранекроз (см.).

Особое место среди основных красителей занимает янус зеленый, обладающий способностью избирательно аккумулироваться в митохондриях; его широко используют для их прижизненного выявления.

Многие нейтральные или слабо-ионизированные основные красители и флюорохромы (фосфин 3R, бензпирен) обладают хорошей растворимостью в жирах и поэтому применяются для прижизненного выявления жировых включений.

Безвредность красителей, применяемых для В. о., относительна, они всегда влияют на те или иные клеточные процессы: янус зеленый блокирует дыхание, акридиновый оранжевый тормозит синтез белка; длительное воздействие нейтральным красным, акридиновым оранжевым, толуидиновым синим и т. п. приводит к агглютинации рибосом с образованием так наз. кринома — базофильной цитоплазматической структуры, возникающей в клетке под влиянием В. о.

См. также Гистологические методы исследования.


Библиография: Граменицкий E. М. Прижизненная окраска клеток и тканей в норме и патологии, Л., 1963, библиогр.; Зеленин А. В. Взаимодействие амино-производных акридина с клеткой, М., 1971, библиогр.; Левин С. В. и Гольфанд К. А. Методика цитофотометрии витально окрашенных клеток, Цитология, т. 6, № 4, с. 525, 1964, библиогр.



Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание