СНЕСАРЕВА МЕТОДЫ

Перейти к: навигация, поиск

СНЕСАРЕВА МЕТОДЫ (П. Е. Снесарев, советский нейроморфолог, 1876—1954) — методы окраски препаратов для выявления элементов нейроглии ткани мозга и аргирофильных волокон соединительной ткани.

При окраске этим методом используют материал, фиксированный в 15—20% нейтральном формалине. Для комплексной окраски нейроглии замороженные срезы толщиной 5 — 20 мкм на 15—20 сек. погружают в 1% водный р-р эритрозина, промывают дистиллированной водой и на 30 сек. переносят в 0,5% р-р фосфорно-молибденовой к-ты с добавлением р-ра двууглекислого калия (1:1000) — 5 —10 капель на 20 мл к-ты. Срез ополаскивают дистиллированной водой, распластывают на смазанном белок-глицерином стекле и обрабатывают смесью метилового спирта с хлороформом (1:2) до просветления. На препарат по каплям наносят р-р Мая—Грюнвальда, к-рый через 30—40 сек. разводят 1 — 3 каплями дистиллированной воды, продолжая окрашивание еще 5 — 10 мин. Затем краску сливают, срез ополаскивают дистиллированной водой и обрабатывают с целью дифференцировки разведенной ледяной уксусной к-той (1:2) до четкого выявления серого и белого вещества мозга. Препарат промывают дистиллированной водой, обсушивают фильтровальной бумагой, погружают на 1—3 сек. в ацетон, проводят через ксилол и заключают в бальзам. Глиальные волокна окрашиваются в синий цвет, ядра клеток — в розовый и синий, хорошо выявляется патол. зернистость нейроглии, миелин приобретает красноватый цвет, тельца Негри — синий.

Для импрегнации аргирофильных волокон соединительной ткани хорошо промытые кусочки ткани выдерживают в термостате при f 37° от 6 до 48 час. сначала в 12%, а затем в 24% р-ре желатина на 1% карболовой воде. Желатин быстро охлаждают до затвердения, вырезают из него блоки с кусочками ткани, уплотняют блоки в 10% формалине, быстро промывают и режут на замораживающем микротоме. Срезы толщиной 5—20 мкм на 48 час. помещают в 4% р-р железных квасцов (р-р аммония-железа сульфата), промывают в 2—3 порциях дистиллированной воды, переносят на 24 часа в 5 —10% р-р нитрата серебра (в темноте) и по одному импрегнируют аммиачным серебром 5 — 10 мин. (см. Бильшовского — Грос — Лаврентьева метод). Далее срезы обрабатывают в течение 3—5 мин. 20% р-ром нейтрального формалина, промывают в водопроводной воде, золотят (см. Золочения методы), фиксируют 5% р-ром гипосульфита, докрашивают ядра гематоксилином или кармином, обезвоживают и заключают в бальзам. Аргирофильные волокна (см.) окрашиваются в темно-коричневый цвет, а окружающий фон — в желтый. Метод пригоден также для наклеенных на стекло парафиновых срезов; в этом случае срезы до пропитывания желатином депарафинируют с помощью органических растворителей и тщательно промывают дистиллированной водой.

Кроме того, к С. м. относится модификация окраски нервных клеток методом Нигеля, предназначенная для окраски срезов мозга (см. Ниссля метод), модификация паноптической окраски по Паппенгейму (см. Паппенгейма методы) и модификация метода Альтманна окраски митохондрий, пригодной для материала, фиксированного формалином (см. Альтманна методы).



Библиография: Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники, с. 187, Л., 1969; Снесарев П. Е. О применении серебряных осадочных методов к парафиновым сериям, Лаборат. практ., № 9, с. 1, 1932.


Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Рекомендуемые статьи