КОНВЕЯ МЕТОД

КОНВЕЯ МЕТОД (Е. J. Conway) — количественное определение аммиака с использованием принципа изотермической отгонки. Применяется для определения аммиака в р-рах, а также в крови, моче и при ферментативных реакциях, сопровождающихся освобождением аммиака. Предложен в 1933 г.

Выделившийся аммиак пробы связывается серной к-той; из р-ра образовавшегося сернокислого аммония аммиак вытесняют сильной щелочью.

Чашка Конвея: 1 — внешняя часть (для исследуемой пробы и раствора щелочи); 2 — внутренний цилиндр (для серной кислоты).

Освободившийся аммиак поглощается титрованным р-ром к-ты. Разложение сернокислого аммония и поглощение аммиака проводят в чашках Конвея (рис.).

Чашка Конвея по форме напоминает стеклянный лабораторный кристаллизатор диам. 7—8 см, в центральную часть к-рого впаян дополнительный (внутренний) цилиндр диам. 3 см. Края чашки смазывают вакуумной смазкой. Во внутренний цилиндр наливают титрованную серную к-ту, во внешнюю часть чашки — исследуемую пробу, сюда же добавляют щелочь; чашку быстро закрывают стеклом, покачиванием сливают щелочь и исследуемую пробу и оставляют стоять до окончания диффузии аммиака из подщелоченной пробы в серную к-ту, налитую во внутреннюю часть чашки. После окончания поглощения выделившегося аммиака к-той (обычно через 18—24 часа) его количество определяют колориметрически.

В практике мед.-биол, лабораторий используются различные модификации метода. Вместо чашек Конвея применяют обычные пенициллиновые склянки или склянки с полуперегородкой для раздельного внесения пробы и щелочи. Для ускорения диффузии аммиака склянки помещают на 2 часа в термостат при 37° или используют специальные ротаторы для постоянного перемешивания проб. Приемником аммиака служат кусочки фильтровальной бумаги, смоченные к-той и подвешенные на стеклянной палочке. Из реагентов, дающих цветную реакцию с аммиаком, чаще других используют реактив Несс лера (см. Несслера реактив), индофенольный реактив, нингидриновый реактив и дихлоризоциануратный реактив.

Ход определения

1 мл исследуемой пробы помещают в пенициллиновую склянку, туда же добавляют 1 мл насыщенного р-ра K2CO3. Склянку быстро закрывают резиновой пробкой с вставленной в нее стеклянной палочкой, смоченной в 1 н. р-ре H2SO4 (ок. 0,02 мл). Для диффузии аммиака пробы оставляют стоять на ночь при комнатной температуре. По окончании диффузии склянки открывают, пробки со стеклянными палочками переносят в чистые пенициллиновые склянки с отмеренным количеством безаммиачной воды (5 мл), энергично встряхивают, добавляют 0,5 мл реактива Несслера и колориметрируют при длине световой волны 400—420 нм против контрольной пробы (без испытуемого р-ра). Для расчета количества аммиака готовят калибровочную кривую, колориметрируя стандартные р-ры (NH4)2SO4. Метод позволяет определить от 2 до 50 мкг аммиака в пробе с точностью ± 0,5 мкг.

Количество хим. реактивов, используемых при проведении определения азота К. м., может меняться в зависимости от характера исследуемого материала.

Определение небелкового азота К. м. является самым точным, но рутинного применения в клин, лабораториях не находит в основном из-за трудоемкости. Обычно К. м. служит для проверки точности и правильности других методов.



Библиография: Биохимические методы исследования в клинике, под ред. А. А. Покровского, с. 77, М., 1969; Методы современной биохимии, под ред. В. Л. Кретовича и К. Ф. Шольца, с. 58, М., 1975; Современные методы в биохимии, под ред. В. Н. Оре-ховича, с. 17, М., 1977; Conway E. J. Microdiffusion analysis and volumetric error, L., 1962, bibliogr.



Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание