ШАБАДАША СПОСОБЫ

ШАБАДАША СПОСОБЫ (А. Л. Шабадаш, советский нейрогистолог и гистохимик, 1898 — 1978) — методы фиксации и окраски гистологических препаратов, разработанные А. Л. Шабадашем. Важнейшими из них являются метод суправитальной окраски нервной ткани, способы выявления гликогена, определения изоэлектрических точек клеточных нуклеопротеидов.

Метод суправитальной окраски нервной ткани животных был описан Шабадашем в 1929 году. Он заключается во введении в кровяное русло изотонического раствора метиленового синего в смеси с субстратами (например, глюкозой) и кофакторами (например, ионами магния). На гистологических препаратах элементы нервной ткани (особенно четко структуры вегетативной нервной системы) окрашиваются при этом в голубой цвет.

Способ выявления гликогена (см.) и других полисахаридов (см.) был предложен А. Л. Шабадашем в 1939 году. Он основан на окислении полисахаридов перйодатом натрия (калия) с образованием свободных альдегидных групп, дающих с реактивом Шиффа (см. Шиффа реактив) осадок вишневого цвета. А. Л. Шабадашем разработан ряд фиксаторов, предназначенных для введения в артерии исследуемого органа и способствующих сохранению полисахаридов. Наибольшее распространение получил нейтральный фиксатор, пригодный также для погружной фиксации (96% этиловый спирт 100 мл, нитрат меди 1,8 г, нитрат кальция 0,9 г, формалин 10 мл). Этот фиксатор дает хорошие результаты и при проведении других гистохимических реакций, в частности при выявлении нуклеиновых кислот. После обработки слабощелочным раствором перйодата и реактивом Шиффа гликоген и содержащие глюкозу белки (в меньшей степени) окрашиваются в красновато-фиолетовый цвет.

В 1953 году был предложен способ определения изоэлектрических точек клеточных нуклеопротеидов: фиксированные препараты окрашивают в последовательной серии растворов основного красителя (например, в 0,25% растворе метиленового синего) на фосфатном буфере с точно градуированными через небольшие интервалы значениями pH (например, от 2,0 до 10,4 с интервалом 0,2). Окраску закрепляют 6% раствором молибденовокислого аммония, препараты обезвоживают и заключают в бальзам. Клеточные структуры, содержащие нуклеопротеиды (гранулы хроматина, ядрышко, митохондрии, рибосомы и др.), приобретают цвет красителя (например, голубой при окраске метиленовым синим). Минимальное значение pH, при к-ром начинается окрашивание структуры, соответствует изоэлектрической точке (см.) нуклеопротеида. С помощью этого метода выявляют строение, число и распределение названных структур, а также их физико-химические свойства (по средней величине изоэлектрических точек органоида можно судить о числе ионизированных групп в его белках, о соотношении диссоциированных фосфорнокислых групп и азотистых оснований, о степени комплексации нуклеиновых кислот с белками и др.).

См. также Гистологические методы исследования, Клетка.

Библиогр.: Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники, с. 35, 262, Л., 1969; Шабадаш А. Л. Теория и практика прижизненной окраски нервной системы метиленовою синью, Горький, 1939; он же, Декальцинация кости нейтральными солевыми растворами, Докл. АН СССР, т. 70, № 3, с. 511, 1950; он же, Гистохимическое обнаружение тигроида нервных клеток, там же, т. 91, № 2, с. 405, 1953; о н ж е, Цитохимические особенности рибонуклеопро-теидов митохондрий и эргастоплазмы, Цитология, т. 1, № 1, с. 15, 1959.

Я. Е. Хесин.



Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: