СЕРЕБРЕНИЯ МЕТОДЫ

СЕРЕБРЕНИЯ МЕТОДЫ (син. методы импрегнации серебром) — способы выявления тканевых и клеточных компонентов (структур) путем пропитывания гистологических препаратов солями серебра. С. м. относятся к методам импрегнации тканевых структур солями металлов (см. Импрегнация). Восстановление (редукция) металлического серебра приводит к осаждению eFO на определенных структурах, к-рые приобретают коричневый или черный цвет. Среди тканевых компонентов различают аргентаффинные, в к-рых редукция серебра осуществляется в темноте за счет их собственных восстановительных свойств (см. Аргентаффинные клетки), и аргирофильные, в к-рых серебро осаждается только под действием света или хим. восстановителей (см. Аргирофильность). Сущность С. м. остается не вполне ясной, большинство этих методов основано на эмпирических разработках. По-видимому, в феномене аргентаффинности определенная роль принадлежит присутствию в клетках производных катехоламинов (см.), а развитие аргирофилии связано, в, частности, с наличием в тканевых компонентах сульфгидрильных групп (SH-групп) и ненасыщенных жирных к-т.

Из солей серебра для С. м. обычно используют 0,5—20% р-ры нитрата серебра, нередко в виде аммиачного серебра (см. Бильшовского — Грос — Лаврентьева метод). Применяют также ацетат, карбонат, пикрат, лактат серебра, протаргол и др. Во всех случаях для С. м. требуются химически чистые реактивы и посуда; работать следует стеклянными иглами, избегая соприкосновения препаратов с металлом.

В зависимости от цели С. м. проводят либо на свежих, нефиксированных препаратах, либо после фиксации, чаще 10—20% р-ром формалина. Без фиксации С. м. выявляют межклеточные границы эпителия и мезотелия (см. Ранвье методы). Серебро может служить также агентом, фиксирующим ткань. Фиксирующие свойства р-ров серебра используют при импрегнации выстилки альвеол по методу Эберта, когда через бронх или трахею наполняют долю или все легкое 0,5% р-ром нитрата серебра с последующим УФ-об-лучением замороженных срезов легкого, а также для выявления нейрофибрилл в свежих кусочках ткани мозга (см. Рамон-и-Кахаля методы).

Дин и Морс (Н. W. Deane, A. Morse, 1948) предложили использовать восстановительные свойства аскорбиновой к-ты (витамина С) для выявления ее включений в тканях: свежие кусочки ткани обрабатывают насыщенным р-ром нитрата серебра в смеси спирта, воды и ледяной уксусной к-ты, затем их переносят в кислый фиксаж, обезвоживают и заливают в парафин. Под микроскопом включения витамина С наблюдаются в виде черных точек.

На фиксированных препаратах С. м. позволяют элективно выявлять многие элементы нервной ткани (нервные клетки, нейрофибриллы, нейроглию, осевые цилиндры и узлы миелиновых нервных волокон, безмиелиновые волокна, нервные окончания), аргирофильные волокна соединительной ткани, аргентаффинные клетки желудка и кишечника (аргентаффиноциты), хромаффинные клетки надпочечников и параганглиев, нек-рые пигменты, а также известь (см. Коссы способы) и др. Методы серебрения применяют также в бактериологии (см. Левадити метод), вирусологии (см. Морозова метод), цитологии — импрегнация комплекса Гольджи (см, Гольджи комплекс), выявление ядрышковых организаторов (см. Ядрышко).

Разработан ряд вариантов С. м. для выявления определенных элементов нервной ткани в различных отделах нервной системы. Эти варианты различаются по составу фиксирующих смесей п способам редукции серебра. Так, элементы нервной ткани изучают либо путем обработки серебром целых кусочков ткани (тотальная импрегнация) с последующим изготовлением срезов, напр, при тотальной импрегнации с пиридином по Бильшовскому, варианте этого способа — методе Буке, а также при использовании методов Гольджи, Рамон-и-Кахаля (см. Гольджи метод, Рамон-и-Кахаля методы), либо путем импрегнации замороженных срезов (см, Бильшовского — Г рос — Лаврентьева метод, Миягавы — Александровской метод, Ортеги методы). Периферические нервы и их окончания хорошо выявляются по методу Кампоса, представляющего собой модификацию метода Билыновского — Грос— Лаврентьева.

Для серебрения аргирофильных волокон (см.) на срезах соединительной ткани применяют различные варианты предложенного в 1904 г. для выявления нейрофибрилл метода Биль-шовского (см. Бильшовского — Грос — Лаврентьева метод). Мареш (R. Ма-resch, 1905) применил этот метод для импрегнации фибрилл соединительной ткани. В методе Фута до импрегнации до методу Бильшовского замороженные срезы обрабатывают р-рами^перманганата калия и щавелевой к-ты. Импрегнация аргпро-фильных волокон по методу Валльгре-на в настоящее время почти не применяется. Применяют также метод Ачу-карро в модификациях Ортеги (Р. del Rio Hortega) для замороженных срезов и Кларфельда (Klarfeld) — для целлоидиновых срезов (см. Ортеги методы). Хорошие результаты дают также методы, предложенные П. Е. Снесаревым для замороженных и парафиновых срезов (см. Снесарева методы).

При всех С. м. быстрое прекращение серебрения достигается путем погружения препаратов в аммиачную воду (разведенный в три раза 25% р-р аммиака). Избыточное осаждение серебра можно устранить диф-ференцировкой в 0,25% р-ре перманганата калия, 2% р-ре персульфата аммония и др. После применения С. м. срезы можно тонировать р-рами солей золота (см. Золочения методы).

См. также Гистологические методы исследования.



Библиогр.: Лилли Р, Патогистологическая техника и практическая гистохимия, пер. с англ., с. 216, 222, М., 1969; Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники, с. 181, JI., 1969; Р о м е й с Б. Микроскопическая техника, пер. с нем., с. 309, М., 1954.



Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: