НЕФЕЛОМЕТРИЯ

НЕФЕЛОМЕТРИЯ (греч. nephele облако + metreo мерить, измерять) — оптические методы определения концентрации, размеров и формы частиц в дисперсных системах (суспензиях, эмульсршх, коллоидных растворах и в растворах полимеротз), основанные на измерении интенсивности рассеянного света при прохождении через дисперсные системы светового потока. Нефелометри-ческие методы широко используются в мед.-биол, исследованиях, они входят в число унифицированных методов клин, лабораторных исследований, принятых в СССР. К таким методам относятся нефело-метрические методы определения содержания белка в моче (с применением сульфосалициловой к-ты), в цереброспинальной жидкости и в жидкостях серозных полостей, а также тимоловая проба, сулемово-осадочная реакция (см. Коагуляционные пробы) и др. Эти методы не обладают высокой точностью азотометрических и биуретовых методов, однако они просты в исполнении и удобны: выполнение анализа занимает 10—15 мин. и не требует сложного оборудования; мутные взвеси устойчивы в течение 40—60 мин. Интенсивность светорассеяния, называемого также эффектом Тиндаля, зависит от соотношения размеров диспергированных частиц и длины волны (Я) падающего света. Различают два способа измерения интенсивности светорассеяния. Если наибольший размер взвешенных частиц меньше 0,1 Я, то рассеяние света симметрично; при этом интенсивность рассеянного света измеряют в направлении, перпендикулярном направлению падающего светового потока; это — собственно Н. Светорассеяние частицами больших размеров наиболее интенсивно в направлении основного светового потока, падающего на исследуемую дисперсную систему. Измерение интенсивности светорассеяния, производимого в направлении основного светового потока, называется тур-бидиметрией. В аналитической химии и биохихмии используют два варианта нефелометрии и турбидиметрии. Первый вариант используют для анализа природных мутных сред. При этом мутность объекта исследования измеряется без проведения дополнительных операций. Т. о. анализируют питьевые и сточные воды, определяют плотность суспензий микроорганизмов, концентрацию пыли в воздухе и т. п. Второй вариант применяют для определения концентрации веществ, используя их искусственные суспензии. Определяемое вещество переводят в малорастворихмое соединение, к-рое остается в виде взвеси, анализируемой при помощи предварительно построенных калибровочных графиков. Так определяют концентрацию ионов S042- путем образования суспензии BaS04, концентрацию аммиака с помощью реактива Несслера (см. Несслера реактив), содержание вещества в белковых фракциях после обработки осадите-лем (трихлоруксусной или сульфосалициловой к-тами, сульфатами натрия или аммония и др.).

Рассеяние и поглощение света в дисперсных системах зависит не только от концентрации, но также от размера, формы и поверхности частиц дисперсной фазы. Измеряя интенсивность светорассеяния в р-рах, содержащих различные концентрации полимеров, определяют их мол. вес (массу). Данные о форме частиц получают с помощью измерения угловой зависимости и степени поляризации рассеянного света.

Нефелометрические и турбидиметрические методы менее точны, чем другие фотометрические методы, поэтому их применяют при анализе соединений, для к-рых не существует иных методов исследования. В последних модификациях точность нефелометрического анализа заметно возросла. В клин, биохимии Н. используют при анализе крупных молекул, суспензий и молекулярных комплексов. Турбидиметрию применяют, напр., для регистрации фракций липопротеидов в сыворотке крови при ультрацентрифугировании, а также для измерения активности липаз (см.) в сыворотке крови. Н. используют при определении концентрации белков после реакции преципитации в полуавтоматических анализаторах. Нефелометрические определения проводят с помощью специальных фотоэлектрических приборов — нефелометров или фотоэлектрических колориметров, имеющих приспособления для Н., напр. ФЭК Н-57 (см. Фотометрия).



Библиография: Асатиани В. С. Биохимическая фотометрия, М., 1957; Физикохимические методы анализа, под ред. В. Б. Алесковского и К. Б. Яцимирского, JI., 1971; Henry С. Turbidimetric microdetermination of lipase activity by assay on a sequential analyser, Sci. Tools, v. 23, p. 10, 1976; Ma S. K., S c h u m a-k e r V. N. a. K n o b 1 e r С. M. Turbidimetric ultracentrifugation, J. biol. Chem., v. 252, p. 1728, 1977.



Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: