КУМБСА РЕАКЦИЯ

КУМБСА РЕАКЦИЯ (R. R. А. Coombs, англ. иммунолог, род. в 1921 г.; син.: проба Кумбса, антиглобулиновый тест) — иммунологическая реакция для выявления неполных антител к ауто- и изоантигенам эритроцитов.

Реакция была разработана в 1908 г. Мореши (С. Moreschi), но получила широкое применение лишь с 1945 г. после того, как Кумбсом была показана ее роль в определении совместимости при гемотрансфузиях, резус-конфликте, диагностике аутоаллергических и аутоиммунных состояний и др.

К. р. основана на использовании в ней специально приготовленного препарата — антиглобулиновой сыворотки. В присутствии антиглобулиновой сыворотки эритроциты, нагруженные неполными антителами, агглютинируются. Эритроциты, не содержащие на своей поверхности антител, остаются неагглютинированными.

К. р. широко применяется для: а) установления состояния изосенсибилизации, т. е. обнаружения изоантител, возникающих при повторных переливаниях крови (см. Переливание крови) или беременностях (см. Беременность); б) выполнения пробы на совместимость при гемо-трансфузиях; в) определения в эритроцитах разновидности резус-фактора (см.); г) обнаружения аутоиммунных антител на эритроцитах больных приобретенной гемолитической анемией (см.) и другими аутоаллергическими болезнями (см.), а также при некоторых инфекциях, протекающих с аллергическим компонентом; д) обнаружения изоиммунных антител, фиксированных на эритроцитах детей, страдающих гемолитической болезнью новорожденных (см.). К. р. применяется также в судебно-медицинских и антропологических исследованиях.

Основным материалом для постановки К. р. являются сыворотка или цитратная плазма и эритроциты, больного. Различают два варианта К. р.: непрямую и прямую. При непрямой К. р. изучают сыворотку больного, в к-рой определяют свободно циркулирующие антитела. При прямой К. р. исследуют эритроциты на присутствие антител, фиксированных на этих форменных элементах крови.

Антиглобулиновую сыворотку для К. р. получают путем иммунизации лаб. животных (кроликов, коз, овец и др.) глобулинами, выделенными из сыворотки человека фракционированием этанолом, сернокислым аммонием или гель-фильтрацией на сефадексе. При получении антиглобулиновой сыворотки необходимо удалить гетероагглютинирующие антитела, возникающие в результате иммунизации животных глобулинами человека. Достигают этого путем адсорбции иммунной сыворотки смесью эритроцитов людей с различной группой крови [0(1), А(II), В(II), AB(IV)] или разведением ее изотоническим р-ром хлорида натрия. В последнем случае титр гетеро-агглютининов должен быть невысок (1 : 16 — 1 : 32), с тем чтобы антиглобулиновая сыворотка после разведения сохранила хорошую активность в К. р.

Непрямая Кумбса реакция

Непрямая Кумбса реакция проводится в два этапа. Первый этап выполняют в специально предназначенных для этой цели небольших пробирках размером 4 X 0,5 см. В каждую пробирку к трем каплям сыворотки (цельная, 1 : 2 и т. д.), в к-рой подозревают наличие антител, добавляют одну каплю осадка эритроцитов известного антигенного состава. Содержимое пробирки перемешивают и помещают в термостат при t° 37° на 1 час. Затем эритроциты троекратно отмывают изотоническим р-ром хлорида натрия. Второй этап состоит в приготовлении 5% взвеси отмытых эритроцитов и соединении на белой (фарфоровой) пластинке со смачиваемой поверхностью одной капли эритроцитов с одной каплей антиглобулиновой сыворотки. Учет результатов выполняют до 10 мин. Исключение ложноположительных результатов производят путем выполнения контрольных исследований. Использование изотонического р-ра хлорида натрия вместо антиглобулиновой сыворотки не должно сопровождаться агглютинацией эритроцитов. Выполнение непрямой К. р. в отношении эритроцитов известного фенотипа изоантигенов позволяет установить специфичность антител. Напр., исследование сыворотки больного с эритроцитами 0(I), CDE, Kk, Fya; 0(1), CDe, Kk, Fуа; 0(I), сDe, Кк, Fya; 0(I), cDE, Кк, Fya; 0(I), cde, kk, Fya показало положительный результат с образцом крови в 1-м и 4-м случаях; другие образцы крови (2, 3, 5-й случаи) показали отрицательный результат. Сыворотка содержит анти-Е-антитела. С помощью непрямой К. р. могут быть выявлены неполные антитела против антигенов: С, D, Е, с, е; К, k; Fya, Fyb; Lea, Leb; Jka, Jkb и др. (см. Группы крови).

Прямая Кумбса реакция

Прямая Кумбса реакция по технике выполнения соответствует второму этапу непрямой К. р.: троекратно отмытые изотоническим р-ром хлорида натрия исследуемые эритроциты больного (5% взвесь) соединяют с антиглобулиновой сывороткой. Прямую К. р. выполняют, когда есть основание полагать, что эритроциты исследуемого больного in vivo уже сенсибилизированы антителами. Положительная прямая К. р. служит диагиостическим признаком при гемолитической болезни новорожденных, обусловленной сенсибилизацией организма женщины к антигенам плода и проникновением антител через плаценту в организм ребенка, а также при приобретенной гемолитической анемии.

За последние годы К. р. существенно усовершенствована. С ее помощью удается не только констатировать наличие на эритроцитах антител, но и установить класс иммуноглобулинов (см.). Для этого используют сыворотку против отдельных классов иммуноглобулинов: IgG, IgM, IgA. Изоиммунные антитела против резус, Келл-антигенов, Даффи-антигенов и других антигенов, а также тепловые аутоиммунные антитела, как правило, относятся к IgG. Холодовые аутоиммунные антитела, а также изоиммунные антитела против Le и некоторых других антигенов, как правило, относятся к IgM. Природу IgA имеют лишь редко встречающиеся аутоиммунные антитела (см. Аутоантитела) .



Библиография: Дыгин В. П. Аутоиммунные заболевания в клинике внутренних болезней, Л., 1970, библиогр.; Кассир-с к и й И. А. и Алексеев Г. А. Клиническая гематология, М., 1970; Косяков П. Н. Изо антигены и изо антитела человека в норме и патологии, М., 1974, библиогр.; В о i v i n P. e. a. Les anemies hemolytiques, p. 93, P., 1971, bibliogr.; Clinical aspects of immunology, ed. by P. G. H. Geli а. о., Oxford, 1975; Coombs R. R. A., M o u г a n t A. E. a. Race R. R. In-vivo isosensitisation of red cells in babies with haemolytic disease, Lancet, v. 1, p. 264, 1946.




Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: