БУТАНОЛЭКСТРАГИРУЕМЫЙ ЙОД

БУТАНОЛЭКСТРАГИРУЕМЫЙ ЙОД — йод биологически активных тиронинов сыворотки крови (тироксина и трийодтиронина). Применяется как тест для диагностики заболеваний щитовидной железы (см. Зоб диффузный токсический, Гипотиреоз). Техника определения состоит из следующих процессов: экстракция йодированных аминокислот из сыворотки крови в кислой среде н-бутанолом; отмывание бутанолового экстракта от йодированных тирозинов и неорганического йода щелочным реактивом (4 н. раствор NaOH, содержащий 5% Na2CO3); выделение элементарного йода из бутанолового экстракта дистилляцией, сухим озолением или окислительным отщеплением; количественное определение йода (титриметрически, колориметрически или радиоактивационным анализом).

Методика: 0,5 мл сыворотки крови вносят в пробирку объемом 8—10 мл с притертой пробкой. К сыворотке прибавляют 0,1 мл 10% раствора H2SO4 и 4 мл н-бутанола. Встряхивают 1 мин. Центрифугируют 10—15 мин. при 2500—3000 об/мин. Бутаноловый экстракт переносят в разделительную воронку емкостью 50—60 мл. Остаток сыворотки экстрагируют еще раз, как описано выше.

Объединенные бутаноловые экстракты промывают щелочным реактивом, для чего в разделительную воронку прибавляют 8 мл щелочного реактива, встряхивают в течение 5 мин. на аппарате для встряхивания. Разделительные воронки размещают вертикально в штативе и дают отстояться 10 мин. для разделения водной и бутаноловой фаз. Щелочной слой сливают. Промывание проводят еще два раза, как описано выше. После удаления следов щелочного раствора в воронку приливают 4 мл 0,005 н. раствора церия сернокислого (приготовляют его разведением основного раствора церия 0,35 н. H2SO4; основной раствор готовят растворением 10,1 г церия сернокислого окисного в 250 мл 5 н. раствора H2SO4). Воронки встряхивают 30 мин. Слой церия сливают. Бутаноловую фазу промывают 8 мл воды при встряхивании в течение 5 мин. Через 20 мин. отстаивания водную фазу отбрасывают. В бутаноловый экстракт вносят 1 мл 0,03 % раствора бромистого калия и 4 мл 0,25 н. NaOH. Встряхивают 15 мин. и после отстаивания в течение 30 мин. водный слой переносят в пробирки, в которых проводят реакцию для колориметрии.

Колориметрия: в каждую пробирку добавляют 3 мл 0,3 н. раствора арсенита (приготовляют: 7,42 г мышьяковистой к-ты растворяют в 250 мл бидистиллированной воды, добавляют 14 мл конц. H2SO4 и доводят бидистиллированной водой до 500 мл; при растворении подогревают, не доводя до кипения). Пробы помещают в водяную баню с t° 42°. В баню помещают также пробирку с 0,01 н. раствором церия в количестве, достаточном для серии определений (приготовляют разбавлением основного раствора церия 10% раствором H2SO4 в отношении 1 : 10). Через 10 мин. в каждую пробирку прибавляют по 1 мл 0,01 н. раствора церия так, чтобы содержимое каждой пробирки фотометрировать через 30 мин. Колориметрию проводят при длине волны 400 нм против дистиллированной воды. Количество тироксина и трийодтиронина определяют по калибровочной кривой, построенной с учетом добавки тироксина к сыворотке в концентрациях 0,0; 0,02; 0,04; 0,08; 0,16 мкг с последующей обработкой сыворотки, как описано выше.

Количество тироксина и трийодтиронина у здоровых составляет 3,0—7,5 мкг%, при первичном гипотиреозе до 3,0 мкг%. при тиреотоксикозе — 7,5—28,0 мкг% .


Библиография: Баранов В. Г. и Николаенко Η. Ф. Заболевания щитовидной железы, Многотомн, руководство по внутр. бол., под ред. Ε. М. Тарсева, т. 7, с. 23, Л., 1966; Г р о л л м а и А. Клиническая эндокринология и ее физиологические основы, пер. с англ., М., 1969, библиогр.; P о s n e г 1. A simplified procedure for the determination of butanol-extractable iodide in serum or plasma, J. Lab. clin. Med., v. 57, p. 314, 1961.



Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: