БУРШТЕЙНА МЕТОД

БУРШТЕЙНА МЕТОД (M. Burstein) — количественное определение β-липопротеидов и общего холестерина в β-липопротеидной фракции сыворотки крови. Метод предложен Бурштейном в 1956 г.

В основу метода положено осаждение β-липопротеидной фракции гепарином в присутствии хлористого кальция при определенной реакции среды. По степени помутнения раствора определяют содержание β-липо-протеидов в сыворотке крови. Общий холестерин, входящий в состав β-липопротеидов, определяется по цветной реакции Либерманна — Бур-харда в модификации Ильки (см. Либерманна-Бурхарда реакция, Ильки метод).

В норме содержание β-липопротеидов в сыворотке крови колеблется в пределах 350—600 мг%. Повышение содержания наблюдается при атеросклерозе, острых гепатитах, циррозах печени, некоторых формах желтухи, диабете и других заболеваниях. Понижение содержания β-липопротеидов в сыворотке крови наблюдается при β2-плазмоцитоме и некоторых заболеваниях наследственного происхождения.

Содержание общего холестерина в β-липопротеидной фракции в норме составляет в среднем 130 мг%. Резкое повышение содержания его в крови характерно для атеросклероза, диабета, нефрозов и т. д. Гипохолестеринемия бывает при аддисоновой болезни, острых гепатитах, инфекционных заболеваниях и др. (см. Холестерин).

1. Определение β-липопротеидов. 2 мл 0,025 М раствора хлорида кальция смешивают с 0,2 мл исследуемой сыворотки и определяют оптическую плотность (D1) на фотоэлектроколориметре при длине волны 720 нм в кювете с толщиной слоя 0,5 см по отношению к дистиллированной воде. Затем добавляют 0,04 мл 1% раствора гепарина, перемешивают и строго через 4 мин. снова колориметрируют, получая значение D2.

В случае липемических сывороток измеряют мутность исследуемого раствора до и после добавления раствора гепарина. Оптическую плотность, найденную перед добавлением гепарина, вычитают из оптической плотности, измеренной после прибавления гепарина. У нелипемических сывороток оптическую плотность корректируют вычитанием 0,02—поправки на оптическую плотность самой сыворотки.

Расчет можно производить по калибровочной кривой, построенной для стандартного раствора липопротеидов, или по эмпирической формуле: (D2 — D1)*1000 = мг% β-липопротеидов, где 1000 — стандартный коэффициент пересчета (предложен М. Ледвиной, 1960).

2. Определение общего холестерина, входящего в состав β-липопротеидной фракции. В пробирку вносят 0,25 мл сыворотки крови, затем 5 мл 0,025 М раствора хлорида кальция и 0,1 мл 1% раствора гепарина, перемешивают и оставляют на ночь в холодильнике. Затем содержимое пробирок снова перемешивают и центрифугируют. Надосадочную жидкость отбрасывают, к осадку добавляют 2,1 мл раствора Ильки (смесь 1 ч. ледяной уксусной к-ты, 5 ч. уксусного ангидрида и 1 ч. конц. серной к-ты), перемешивают, закрывают притертой пробкой и ставят в термостат на 10 мин. при t° 30—35°. После этого содержимое пробирки перемешивают и колориметрируют при длине волны 720 нм в кювете с толщиной слоя 0,5 см. Контролем служит реактив Ильки.

Расчет производят по калибровочной кривой, построенной для стандартного раствора холестерина.


Библиография: Биохимические методы исследования в клинике, под ред. А. А. Покровского, с. 292, М., 1969; Ледвина М. Определение β-липопротеинов сыворотки крови турбидиметрическим методом, Лабо-рат. дело, № 3, с. 13, 1960; Burstein М. et Samaille J. Sur une nouvelle m6thode de dosage des 8-lipoprot6ines s6ri-ques par l’hSparine, С. R. Acad. Sci. (Paris), t. 243, p. 2185, 1956.



Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: