БАРКЕРА-САММЕРСОНА МЕТОД

БАРКЕРА-САММЕРСОНА МЕТОД (S. В. Barker, W. H. Summerson) — метод количественного определения молочной кислоты в крови. Описан в 1941 году. Используют для исследования различных по происхождению нарушений метаболизма углеводов (см. Углеводный обмен).

Метод основан на взаимодействии уксусного альдегида (образующегося при нагревании молочной кислоты с концентрированной серной кислотой) с поксидифенилом, в результате которого образуется соединение, окрашенное в фиолетовый цвет. Интенсивность окраски измеряется любым колориметрическим методом.

В норме содержание молочной кислоты в крови колеблется в пределах 5—15 мг% .

Техника определения 0,1 мл (или 0,2 мл) крови смешивают с 0,5 мл дистиллированной воды и добавляют 1 мл 10% раствора трихлоруксусной кислоты. Смесь оставляют на льду 10—15 минут. (для лучшего осаждения белков) и центрифугируют 3 минуты при 3000 об/минуту. Надосадочную жидкость переносят в чистую центрифужную пробирку, добавляют 0,5 мл 20% раствора сульфата меди и 0,5 г порошка гидроокиси кальция, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и оставляют на 30 минут, после чего центрифугируют при 3000 об/минуту, Надосадочную жидкость сливают в чистую пробирку и осторожно наслаивают 3 мл концентрированной серной кислоты (на льду). Затем пробирку нагревают 5 мин. на кипящей водяной бане, охлаждают до t° 20°, добавляют 1 каплю (0,05 мл) 1,5% раствора поксидифенила в 0,5% растворе NaOH, ставят в термостат при t° 30° на 30 минут, время от времени перемешивая. Образуется соединение голубого цвета. Затем пробирку на 90 сек. ставят в кипящую водяную баню; голубая окраска переходит в фиолетовую. Смесь охлаждают и фотоколориметрируют при 574 нм.

Концентрацию молочной кислоты вычисляют по формуле:

X = (a × 100)/b мг%,

где а — количество молочной кислоты в миллиграммах, найденное по калибровочной кривой; b — объем крови (в миллилитрах), взятой на анализ.

См. также Гликолиз, Молочная кислота.


Библиогр.: Биохимические методы исследования в клинике, под ред. А. А. Покровского, с. 260, М., 1969; Barker S. В. а. Summerson W. H. The colorimetric determination of lactic acid in biological material, J. biol. Chem., v. 138, p. 535, 1941, bibliogr.


Популярные статьи

Источник: Большая Медицинская Энциклопедия (БМЭ), под редакцией Петровского Б.В., 3-е издание

Поделиться: